死亡时间在法医学中又称死后间隔时间。死亡时间的准确有效推断，是法医学实践工作中最核心的任务之一。推断死亡时间一直是法医病理学的重点和难点之一。在刑事案件的侦察工作中有着举足轻重, 不可替代的作用, 它为侦察工作提供线索, 缩小侦察范围,对确定凶犯和排除嫌疑人等有着非常重要的意义, 受到国内外学者的广泛关注和研究。
摘要：对死亡时间的推测, 是法医学鉴定的重要内容之一, 也是尸体检验后必须要解决的问题。本文从早期死亡时间推断方法、晚期尸体死亡时间推断、死后化学变化推断死亡、尸体上昆虫生长发育的状况推断死亡时间、组织生化等方面，对与死亡时间推断有关方面的研究方法和进展做一综述。
关键词：死亡时间 推断
1、早期死亡时间推断
早期死亡时间即死后24h内推断至关重要, 常通过观察尸温、超生反应、尸僵、尸斑、尸冷等现象来推断死亡时间。
1.1 尸温尸温作为经典的死亡时间推断方法已有上百年历史，操作简便快捷、成本低廉、结果相对可靠，至今仍然在法医实践工作中发挥着不可替代的作用。但是，尸温变化受季节变化、环境温度、尸体衣着、肥胖程度等诸多因素影响，并且在不同地区、不同纬度间存在一定差异，因此仍有相关研究不断对其进行归纳和完善。直肠是经典的尸温测量部位，通过对肛温和其他5个部位的尸温进行对比，发现差异无统计学意义，从理论上证实了操作简便的直肠尸温是实践工作的首选。
1.2 超生反应超生反应是指个体死亡后的一定时期内，组织器官对物理和化学刺激做出功能以及形态上的反应。死后骨骼肌的兴奋性不断下降，根据骨骼肌对机械刺激和电刺激的兴奋性推断死亡时间一直是研究的热点。根据死因将大鼠分为窒息、急性失血、慢性失血3组，通过比较腓肠肌电刺激兴奋性，发现起始潜伏期这一指标在3组间差异无统计学意义，据此认为该指标可作为推断死亡时间的依据。
1.3 尸僵尸僵是早期尸体现象之一, 尸僵形成机制尚未明了, 可能与三磷酸腺苷学说和乳酸学说有关。但可通过超微测定肌节长度来推测尸僵强度, 结果发现肌节越短, 尸僵越强；肌节越长,尸僵越弱, 肌节长度与肌肉收缩强度呈负相关, 尸僵在死后4- 6h达到最低点 。
1.4 尸斑死后由于血液淤滞，血液在重力作用下向低处体表分布而产生尸斑，影响尸斑色泽的主要因素为血红蛋白和黑色素。有研究通过分光光度计对尸斑的色度、色泽等指标进行定量分析，结果表明死后72h 内尸斑变化与死亡时间具有较好相关性，这种对死后早期尸体现象进行量化分析的方法为死亡时间推断提供了新的思路。
1.5 尸冷
尸冷是早期尸体现象之一, 尸检受诸多内外环境因素的影响, 有时利用尸冷推测死亡时间作为参考可以达到其它尸体现象达不到的效果, 通过准确推断死亡时间成功破案。
2、晚期尸体死亡时间推断
尸体蛋白质在腐败细菌的作用下分解液化，逐渐毁坏和消失。尸体腐败还产生具有恶臭的刺激性气体。影响尸体腐败的因素有蛋白质、腹腔腐败气体气压、白骨化等因素。
2.1蛋白质蛋白质是生物体的基本组成成分之一,蛋白质约占人体质量的20%，是形成人体细胞、组织和器官的基础。死后在多种蛋白水解酶和腐败菌的作用下，机体蛋白质成分逐渐分解成为氨基酸和小分子含氮物质。通过免疫印迹、免疫组化法结合图像分析技术对死后蛋白质含量进行半定量测定，可拟合出蛋白质与死亡时间关系曲线，对死亡时间进行有效推断。蛋白质的降解过程受到环境温度和腐败菌等条件影响，其实际应用价值仍有待进一步深入研究。
2.2腹腔腐败气体气压对腹腔腐败气体气压研究也有助于推断死亡时间。据测出气压结果显示, 溺死尸和陆地死尸腹腔腐败气体气压有显著差异，而陆地死尸不因处理方式和体重其气压有所变化。测压结果显示, 按其趋势分为3个阶段,第一阶段上升期即腐败产生期, 第二阶段高峰持续期即持续阶段, 第三阶段下降断即高度软化自溶期。测定腹腔腐败气压的最佳阶段为第一、第三阶段, 各种外界因素对第一阶段影响最大, 对二、三阶段影响依次变小。
2.3白骨化白骨化是指腐败细菌作用引起尸体软组织全部崩解，导致尸骨裸露的过程。 在法医实践中，对田野、森林、江河中发现来历不明的尸骨或开棺复验时，对高度腐败或完全白骨化的尸体，常需推断死亡时间。法医学中对土中白骨化骨骼， 判断其死亡时间推断的方法有以下几种：形态学观察、荧光反应、血清蛋白沉淀 反应、骨蛋白与甘油三酯含量测定、骨骼含氮量测定、牙齿变化，毛发变化。
3、从死后化学变化推断死亡时间
3.1 眼球玻璃体钾离子浓度人死后视网膜细胞自溶，原存于细胞内的钾离子，逐渐进入玻璃体内。据研究，玻璃体钾含量随死后经过时间的延长呈规律性升高，每小时约为0.17mEq/L。
3.2血液的变化
正常血液中乳酸含量为1mEq/L，死后1 h乳酸含量可增加2倍，死后12-24 h可增加50-70倍；尸体血液中非蛋白氨的含量随死后经过时间的延长而增高，可以用于死后24 h之内死亡时间的判断；尸体血液中的钠随死后经过时间的延长而降低，平均每小时下降0.9mEq/L。死后组织细胞酶的活性变化于死后经过时间也存在一定关系。
3.3脑脊液的变化死后10 h内，脑脊液乳酸含量有规律性的升高，10 h以后升高速度减慢并失去规律性；死后30 h之内，非蛋白质氮成差级增加，以后增加速度减慢，脑脊液中的钾在死后20 h内呈规律性增加，氮20 h之后变异较大，不宜用于死亡时间的推断。
3.4根据组织学变化
机体死亡后组织中的各种化学物质功能停止、生物活性消失、浓度逐渐降低，通过生化物质含量变化进行死亡时间推断是法医病理学的重要研究方向。某些器官如肝、心、骨骼肌等，在死后组织细胞的形态改变与死后时间关联方面有一定的规律性，也可作为死亡时间推断的参考。如肝脏，死后6 h出现血管的扩张溶血，12 h血细胞渗出等。
4、根据尸体上昆虫生长发育的状况推断死亡时间20世纪80年代随着法医昆虫学在国际上的迅速发展对侦破工作中的死亡时间、死亡地点、死亡原因特别是死亡时间的推断开辟了新途径。
4.1对昆虫幼虫的超微结构的观察来鉴定昆虫种类
常见尸食性蝇类如巨尾阿丽蝇、丝光绿蝇、大头金蝇、肥须亚麻蝇、红头丽蝇的幼虫均需经过二龄幼虫的形体变化,然后再发育成蛹。以蝇类幼虫的生长发育速率来估计死后经过时间是对传统法医昆虫学方法的进一步补充和发展。蝇蛆的生活史，是指苍蝇从产卵、孵化成蛆，蛆虫生长成熟之后变成蛹，成蝇后破壳而出在现场遗留蛹壳，完成一代蝇蛆的过程。由于蝇蛆各个生长阶段具有规律性，因此在蝇蛆破坏尸体的情况下，是可以运用蝇蛆的生活史判断死亡时间，特别是晚期尸体死亡时间的。蝇蛆生活的各个阶段所需时间受多种因素的制约，其中可以进行定量分析的主要是季节、气温和湿度。蛆虫在不同温度下的发育速率可以用体长、体重等指标来表示。法医昆虫学通过研究蛆虫体长与温度、时间之间的相关性。可以对死亡时间作出较为精确的推算与估计。幼虫在显微镜镜下主要是观察各体节棘带、第一胸节前缘棘带侧而的刚毛、前气门、后气门以及第 7、8 腹节背而表皮等部位的结构差异从而鉴定出各个幼虫的种类。
4.2取幼虫送实验室进DNA ,PCR 扩增技术进行幼虫种类鉴定昆虫种类的出现表现出较强的规律性。最旱在腐败尸体、尸块上出现的主要是双翅日的蝇类。而且大部分属于丽蝇科(巨尾阿丽蝇、丝光绿蝇、大头金蝇等)。这些昆虫成了旱、中期出现在腐败尸体、尸块上的昆虫区系的优势种。故法医昆虫学依据丽蝇科的生活特性，可以较准确地推断出腐败尸体、尸块的时间。而鞘翅目的步甲、阎甲等捕食性昆虫，主要在中、晚期腐败尸体、尸块上出现；隐翅虫、露尾甲，主要出现在尸体高度腐败期或干化期；而郭公虫、金龟子等腐食性甲虫，则主要出现于腐烂尸体晚期或干化腐尸。因此，若在腐败尸体、尸块上采集到甲虫的话，这证明己是尸体腐败的晚期。 酪蝇属在尸体上也发生较迟。当丽蝇、绿绳、麻绳属等尸体上常见的旱、中期蝇类开始减少时。酪蝇属在尸体上却逐渐增多。故酪蝇的出现往往亦在腐败尸体的晚期。水蛇科和皮科幼虫也可出现在腐尸上。但其幼虫之形态与双翅目蝇类的幼虫且甚相同一般从外形上易于鉴别。此外，蚂蚁作为既取食于尸体、尸块，又取食于蛆虫的昆虫类群，则可存在于尸体、尸块上的整个过程中。但其出现的高峰期一般在尸体(块)腐败开始后不久至腐败末期(或干化期)。在腐尸上出现的昆虫均随季节性(随温度)变化而变化。除夏、秋季昆虫区系的演替大致相似外。春冬季腐败尸体上出现的昆虫种类均有较明显的变化。故在实际办案中要注意把握腐败尸体、尸块上各类昆虫成虫的出现是在人体死亡后才到达尸体、尸块上的。因此，我们在推断死亡时间时不要忽略加上在昆虫出现前的尸体死亡时间，否则推断出的时间很容易出现偏差。除此之外，在同一季节的不同时期，由于环境温差的变化，湿度的变化，室内与室外的不同(若室内又有楼层高低的不同)等等因素，都应充分考虑，只有综合性考虑问题，才有可能把从腐败尸体(块)收集到的昆虫较好地应用于刑事案件的侦查实践中去，才有可能把腐败尸体(块)的经过时间推断准确。
5、根据肠胃内内容物消化程度判断死亡时间
5.1胃内食物消化和排空程度，取决于食物的性质
以米饭、蔬菜类食物为例，如果饭粒、蔬菜外形较完整，乳糜减少，只有少量食物进入十二指肠，则一般应当是在饭后 1～2 h死亡的。如果胃内食物全部成乳糜状，只有极少的饭粒、蔬菜残渣，食物已进入大肠，则大约是在饭后 4 h死亡的。胃内食物已全部排空，或者仅残存如青菜头粗皮纤维、海带皮等硬质蔬菜皮，则在饭后 4 ～6 h死亡。如果胃内容物是肉类或油腻重的不易消化的食物，则进食至死亡的时间的推断应当相应延长。
5.2运用胃内容物消化和排空程度来推断进食到死亡的时间
运用胃内容物消化和排空程度来推断进食到死亡的时间，应当充分考虑两个因素：一是不同的人的消化能力和肠道推进食物的速度是有差异的；二是人死后胃肠蠕动和消化酶的作用还要持续一段时间，使食物继续推进和消化。这种情况在尸温下降缓慢时更为明显。
6、从其他方面推断死亡时间6.1超生反映进行推断
其种类很多，可用作推测死亡时间的超生反应有：如心跳停止后4 h左右，瞳孔对依色林和阿托品仍有缩瞳和扩瞳反应等。死后，躯体的组织、器官对刺激还能发生一定反应肌肉的超生反应：人死后2 h内，几乎所有肌肉受机械刺激后均可发生收缩反应，尤以肱二头肌为甚，并且不受环境气温高低的影响。死亡2 h后，则多半只能引起打击处肌肉收缩。死亡超过5 h，一般即不再发生明显的肌肉收缩。死后皮下出血：在进行上述机械刺激试验过程中，被打击的部位可形成皮下出血斑。其出现率随死后时间的延长而迅速下降。如将药物直接注入眼房内，则死后20 h，仍可是阳性反应。汗腺的超生反应：汗腺在肾上腺素、阿托品等药物作用下，死后30 h内，可有发汗反应。
6.2 DNA进行推断DNA是生命遗传物质,由许多脱氧单核苷酸组成的线形双螺旋大分子,是细胞内重要的遗传物质, 主要分布在细胞核内。应用DNA 高度特异性染色方法改良法, 结合计算机图像分析技术,对人死后胸骨骨髓细胞核DNA 含量变化与死亡时间的关系进行研究。国内外法医学工作者通过大量试验性研究证实死后细胞核DNA含量与死亡时间呈负相关系,即死亡时间越长,可通过测定死后骨髓细胞核DNA 含量的测定来推断较晚期尸体死亡时间。尽管应用DNA技术在理论上、技术上有一定优点, 但是由于外界环境温度、死亡原因、损伤、淤血程度, 细菌繁殖及疾病等因素影响死后DNA含量, 并随取材部位而异。另外由于实验方法、条件以及操作人员等各方面的差异,使得结果难以客观化、标准化。大部分实验仍集中在动物尸体上,离人体尸体研究有一段相当长距离,有待探讨。
6、3根据膀胱内尿液的多少推测死亡时间在夜间死亡的人，还可以根据膀胱内尿的充盈程度来推测死亡时间。按照常人的习惯，睡觉前要排尿，如果尸检时见膀胱内尿量甚少，则可能是睡后2—3 h内死亡；如果尿量甚多，则可能是半夜死亡。只是这种情况偶然性较大，所以只能作为参考，而不能仅凭此来判断死亡时间。 |
